副伤寒沙门氏菌的生化特性如下：
发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、山梨醇并产气;不发酵乳糖、蔗糖、杨苷、侧金盏花醇;通常发酵卫茅醇并产气;发酵或不发酵肌醇;不产吲哚;甲基红阳性;V—P阴性;通常不利用枸橼酸盐;硫化氢通常阳性;尿素不水解;明胶很少液化;氰化钾阴性;硝酸盐被还原;运动力阳性;赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性;精氨酸脱羧酶阳性但通常迟缓;N2酸盐NNNN性;苯丙氨酸脱氨酶阴性。
没有以上特性的细菌不属于鸡副伤寒沙门氏菌，除非能证明它们带有已知沙门氏菌血清型的抗原。例如鼠伤寒沙门氏菌哥本哈根变种常引起鸽的副伤寒，但通常从鸽分离时不发酵麦芽糖，所以初次检查易与鸡白痢沙门氏菌混淆。
